Validación del analizador hematológico Lasercyte en burros sanos

Abstract

Los burros tienen un papel central en la economía de países en desarrollado, siendo utilizados como medio de transporte, animales de carga y en labores agrarias. Más recientemente, esta especie también está siendo utilizada como mascota, así como en actividades de asinoterapia o para producción de leche. Debido a la escasa investigación en medicina asnal, muchos clínicos extrapolan rangos de referencia y datos publicados para caballos en burros. Este acercamiento se ha demostrado marcadamente erróneo, pudiendo conllevar graves errores diagnósticos, tratamientos inadecuados o innecesarios, así como aumentando un gasto injustificado para el dueño. El análisis hematológico es una de las bases del examen clínico inicial en cualquier paciente veterinario, siendo esencial establecer rangos de referencia especie-específicos y adaptados a la edad, sexo, raza, localización geográfica y equipamiento utilizado para dicha evaluación hematológica. Los analizadores automáticos hematológicos con tecnología láser son uno de los últimos avances en medicina veterinaria, permitiendo una mayor rapidez y fiabilidad en los parámetros obtenidos que los equipos basados en impedancia o las técnicas de estudio hematológico manual. Los objetivos de esta tesis doctoral fueron estudiar los resultados hematológicos en una amplia población de burros de Andalucía, determinar el nivel de acuerdo entre técnicas para esta especie y validar los resultados obtenidos con el equipo LaserCyte (analizador de tipo láser) en burros. Para desarrollar este trabajo, se obtuvo sangre de una población de 84 burros residentes en varias explotaciones de Andalucía y la misma se estudió mediante técnicas manuales, con un analizador automático de impedancia (Sysmex F820) y con el analizador LaserCyte. También se evaluó el nivel de precisión, exactitud, el error total presente en los resultados, la linealidad y otros parámetros de validación y estandarización para sangre de burro en el equipo LaserCyte. De igual forma, se comparó el grado de acuerdo entre técnicas para determinar si los resultados pudieran ser extrapolables entre sí. Por último, y ante la sospecha de marcadas diferencias en el tamaño leucocitario entre asnos y caballos que pudiesen provocar errores en el algoritmo de clasificación leucocitario de LaserCyte, se realizó un estudio morfométrico del tamaño de las distintas subpoblaciones leucocitarias en asnos. Los resultados obtenidos estuvieron dentro de los rangos hematológicos previamente reportados para esta especie, independientemente de la técnica utilizada. Se observaron diferencias significativas a nivel hematológico entre burros atendiendo al sexo (mayor número de eritrocitos circulantes pero menor hemoglobina y volumen corpuscular medio en machos respecto a hembras) y la edad (tendencia a menores contajes eritrocitarios y leucocitarios, hematocrito y hemoglobina en animales de edad avanzada respecto a jóvenes), las cuales coincidieron con las previamente observadas en esta especie por varios autores. El nivel de acuerdo entre técnicas hematológicas fue, en general, pobre, apareciendo las mayores divergencias en los contajes diferenciales leucocitarios. LaserCyte mostró un rendimiento adecuado para la mayoría de parámetros, a excepción de dichos contajes diferenciales, lo cual muy probablemente estaría relacionado con la ausencia de un algoritmo especie-específico de clasificación leucocitaria en este analizador. Esta teoría también estaría respaldada por los resultados del estudio morfométrico, que mostraron marcadas diferencias en la distribución de los tamaños leucocitarios entre asnos y caballos, en especial respecto al solapamiento entre poblaciones.

Donkeys have traditionally played a central role in developing countries, being used as draft animals. In developed countries, donkeys are an emerging pet animal and new uses, such as onotherapy or milk production, are rapidly growing. Since research in donkeys is scarce, many clinicians extrapolate data and reference ranges from horses. This approach could cause misdiagnoses, unnecessary or inadequate treatments and over cost to the owner. Hematology is a basic tool in veterinary internal medicine. Species-specific intervals are crucial for a proper hematological analysis. Furthermore, differences have been reported in several parameters attending to gender, age, breed and even geographical location. Laser-based hematology analyzers are in general more accurate and costeffective compared to manual techniques and impedance analyzers. This work aims to evaluate hematological data from a donkey population from Andalusia, determine the agreement between techniques in this species and validate the LaserCyte analyzer in donkeys. Samples were obtained from 84 donkeys from several farms in Andalusia and agreement between the results from LaserCyte, Sysmex F820 and manual methods was obtained. Accuracy, precision, total error, linearity and other validation indexes for LaserCyte were calculated in those samples. A morphometric study on donkeys’ leukocytes size was carried out in order to determine any misclassification of white blood cells using equine software. Our results were within reported intervals for this species according to previous studies. Significant differences were observed attending to gender (males showing higher red blood cell counts and lower hemoglobin concentration and mean corpuscular volume) and age (lower blood and white cell counts, hematocrit and hemoglobin concentration were observed in older donkeys compared to younger ones). Those differences were in accordance to previous reports in donkeys by other authors. Agreement between techniques was poor, mostly due to incongruities in the differential leukocyte count. LaserCyte showed a reasonable performance in donkey blood, except for those differentials. This finding could be explained by the use of an equine software and misclassifications of leukocytes due to differences in size or granularity between cells in these species. Indeed, donkeys’ leukocytes size showed marked overlapping and several differences with horses in the morphometric study.