Evaluación clínica, patológica y proteómica de dos aislados venezolanos de Trypanosoma vivax

Abstract

El objetivo de esta investigación fue realizar una evaluación clínica, patológica y proteómica de dos aislados venezolanos de Trypanosoma vivax. Para el estudio se utilizaron dos aislados venezolanos de T. vivax identificados como TvLIEM176 y TvMT1. Los criopreservados fueron expandidos inicialmente en cuatro ovinos de dos años de edad (dos animales para cada aislado). De estos animales se obtuvo sangre para la inoculación de los animales experimentales y además se realizó la purificación de cada aislado para su análisis proteómico. Los grupos experimentales estuvieron conformados por 9 ovejos mestizos de 18 meses de edad los cuales se dividieron en tres grupos de 3 animales cada uno: inoculados con el aislado TvLIEM176 (grupo 1), inoculados con el aislado TvMT1 (grupo 2) y animales controles (grupo 3). Las inoculaciones se realizaron con 106 tripanosomas/animal por vía intravenosa para cada animal respectivamente. Se realizaron evaluaciones clínicas (determinación de la temperatura corporal, frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, además de cualquier otro signo clínico que pudiera presentarse), hematológicas (determinación de la parasitemia, hematocrito, hemoglobina, proteínas totales, contaje de glóbulos blancos y contaje diferencial de los mismos) y serológicas mediante la técnica de ELISA. El análisis proteómico se realizó a través de electroforesis bidimensional diferencial (2D-DIGE) acoplado a espectrometría de masas...

The aim of this study was to perform a clinical, pathological and proteomic evaluation of two Venezuelan isolates of Trypanosoma vivax. For this, two Venezuelan isolates of T. vivax from different geographical areas were used, identified as TvLIEM176 and TvMT1. These isolates were expanded in four sheep (two animals for each isolate). Blood from these animals was obtained for experimental inoculation and for parasite purification and proteomic analysis. Experimental groups were conformed for nine (9) mixed-breed sheep about eighteen (18) months old, divided into three groups: TvLIEM176 (group 1), TvMT1 (group 2) and control (group 3). Each animal was inoculated with 106 trypanosomes by intravenous injection. Clinical (body temperature, heart rate, respiratory rate and any other clinical sign) blood (parasitemia, hematocrit, hemoglobin, serum total protein, white blood cell count and leukogram) and serological (ELISA) evaluations were performed. Proteomes were analyzed by two-dimensional differential in-gel electrophoresis (2D-DIGE) coupled to mass spectrometry. Higher increase in temperature (up to 40 ° C) was observed in the TvMT1- infected animals but parasitaemia was higher (1.2 x 107 trypanosomes/ml) in TvLIEM176-infected animals. The clinical signs observed in experimental animals included lethargy, anorexia, weakness, pale mucous membranes jaundiced, lymphadenopathy, ocular secretions, edema, orchitis and progressive...