An improved method for chromosome preparations from bovine oocytes and zygotes obtained by in vitro maturation and fertilization techniques

Abstract

Matured bovine oocytes and zygotes obtained by in vitro maturation and fertilization techniques (IVM and IVF) were cytogenetically prepared by using an improved method for chromosome preparations. The method, which involves use of trypsinizedhypotonic solution plus a vortex-agitated system and very cold two-step fixation process, contributes to weaken the zona pellucida and allows the swelling of oocytes and zygotes which helps the subsequent spreading of the chromosomes. This method permits to obtain preparations of good quality for examining the number and morphology of the chromosomes of oocytes and zygotes for any meiotic and mitotic stage.

Se logró optimizar un método rápido para analizar citogenéticamente ovocitos y cigotos de bovino obtenidos mediante técnicas de maduración y fecundación in vitro (MIV y FIV). El método, el cual utiliza una solución hipotónica con tripsina, un sistema de agitación mediante vortex y un sistema doble de fijación en frío, contribuye a eliminar fácilmente la zona pelúcida y a hinchar a los ovocitos y cigotos favoreciendo posteriormente la extensión de los cromosomas. Este método permite obtener preparaciones de muy buena calidad para el análisis tanto del número como de la morfología de los cromosomas de los ovocitos y cigotos en cualquier estadío meiótico y mitótico.