Importancia de los anticuerpos antinucleares en la patogenia de la leishmaniosis canina

Abstract

La leishmaniosis canina es una enfermedad parasitaria endémica en toda el área mediterránea. Su curso clínico se caracteriza por su cronicidad y por la gran variedad de síntomas que puede provocar. Parte de este pleomorfismo clínico puede atribuirse a los fenómenos inmunopatológicos que el parásito desencadena en los perros donde la respuesta inmune no es protectora. Dentro de esta categoría se incluye el desarrollo de anticuerpos antinucleares (ANA) pero nunca se ha establecido la especificidad antigénica de estos ANA ni se ha estudiado su correlación con procesos inmunopatológicos graves para el animal como glomerulonefritis inmunomediada. Nuestros objetivos en este trabajo han sido establecer la prevalencia de títulos positivos de ANA en perros con leishmaniosis y determinar los isotipos de inmunoglobulinas que los forman. En segundo lugar, investigar la especificidad antigénica de los ANA presentes en la leishmaniosis canina, especialmente la asociación entre ANA anti-histonas y el desarrollo de insuficiencia renal y glomerulonefritis. Una parte de los animales incluidos lo fueron de forma retrospectiva, mientras que otra parte de la población estudiada se incluyó de forma prospectiva. La prevalencia de títulos positivos de ANA se estableció por IFI usando como substrato criocortes de hígado de rata (60 perros) y cultivos de células Hep-2 (67 perros). En el primer caso, la prevalencia de ANA fue del 23,3% mientras que usando cultivos de células Hep-2 la prevalencia de títulos positivos se elevó hasta el 52,23%. Los títulos oscilaron entre 1:40 (18 perros) y 1:640 (1 perro). Tres muestras alcanzaron un título de 1:80, otras 3 muestras de 1:160 y en 10 perros se obtuvo un título final de 1:320. Sólo tres tipos de patrones de inmunofluorescencia pudieron ser definidos claramente: nuclear, nucleolar y citoplasmático. La mayoría de los perros presentaron sólo un tipo de patrón. El patrón nuclear fue el patrón predominante al estar presente en 15 animales, otros 11 presentaron un patrón citoplasmático y finalmente en 6 animales el patrón fue nucleolar. En 3 ocasiones, las muestras presentaron un patrón mixto que siempre fue una combinación de patrón nuclear y citoplasmático. Las dos técnicas de inmunofluorescencia mostraron una correlación positiva en 7 de las 24 (29%) muestras analizadas....

Canine leishmaniasis is a parasitic disease endemic in the mediterranean basin. Its clinical course is chronic and characterized by a great variety of clinical signs. This clinical pleomorphism may be partly explained by the immunopathologic mechanisms triggered during the infection in those dogs which develop a predominantly humoral non-protective immune response. Included in these immunopathologic mechanisms are the antinuclear antibodies (ANA); neither their antigenic specificity nor their correlation with serious immunomediated processes such as glomerulonephritis has been established in canine leishmaniosis. Our aim in this work was to determine the prevalence of positive ANA titres in dogs with leishmaniosis and the distribution of immunoglobulin isotypes involved in their formation. Another objective was to investigate the association between anti-histone ANA and the development of renal failure and glomerulonephritis. Some of the animals were included retrospectively whereas when it was possible the dogs were included prospectively. The prevalence of positive ANA titres was determined using indirect immunofluorescence assay (IFI) with rat liver cryocuts (60 dogs) or cultured Hep-2 cells as substrate (67 dogs). Using the first method, the ANA prevalence was 23.3%, lower than using Hep-2 cells which yielded a prevalence of 52.23%. The titres with this last method ranged between 1:40 (18 dogs) and 1:640 (1 dog). Three samples had a titre of 1:80, another three samples 1:160 and in 10 dogs the final titre was 1:320. Only three immunofluorescence patterns could be clearly defined: nuclear homogeneoous, nucleolar and cytoplasmic. Most dogs showed a single pattern. The nuclear pattern predominated being present in 15 dogs; another 11 dogs had a cytoplasmic pattern and only 6 dogs showed a nucleolar immunofluorescence pattern. Three samples had a mixed pattern, always a combination of a nuclear and cytoplasmic pattern. Both immunofluorescence techniques showed a positive concordance in 7 out of 24 samples (29%) analysed....