Propagación in vitro de Zabila (Aloe Barbadensis Mill.) utilizando retardantes de crecimiento en sistemas de inmersión temporal
Autor
Albany de Vilchez, Nilca Rosa
Director/es
Nava Fereira, AlbaMartín Martín, L.M.
Pliego Alfaro, Fernando
Editor
Universidad de Córdoba, UCOPressFecha
2016Materia
Aloe Barbadensis Mill.Zábila
Venezuela
Recipientes de Inmersión Temporal Automatizados (RITA)
Retardantes de Crecimiento (RC)
Multiplicación in vitro
Genética
Amplificaciones Aleatoria de ADN Polimórfico (RAPD)
Secuencias Simples Internas Repetidas (ISSR)
METS:
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Los productos extraídos de Aloe barbadensis Mill. (zábila) son
altamente demandados por las industrias farmacéutica, cosmética y
alimentaria. En Venezuela, la propagación de zábila se realiza a través
de hijuelos, una planta produce de tres a cuatro hijuelos por año, lo
cual es insuficiente para desarrollar plantaciones comerciales. Aunque la
propagación in vitro puede ser una alternativa interesante, su uso a
nivel comercial está limitado por los costos de producción. El uso de
Recipientes de Inmersión Temporal Automatizados (RITA®) con
retardantes de crecimiento (RC) en el medio de cultivo, está siendo
considerada una opción de interés para aumentar la eficiencia del
proceso de micropropagación. Con el propósito de obtener un protocolo
optimizado para la multiplicación in vitro de zábila, se evaluaron los
principales parámetros técnicos y biológicos en RITA® utilizando RC.
Así, se diseñaron una serie de experimentos para evaluar el efecto de
los RC, el tiempo y la frecuencia de inmersión, cantidad de brotes
inoculados por recipiente y finalmente, el efecto residual del RC en la
fase de enraizamiento. El ancimidol (ANC) y paclobutrazol (PBZ)
promovieron tanto la formación de conglomerados de brotes como la
reducción del crecimiento longitudinal, aunque se seleccionó el ANC
porque mostró el mayor número de conglomerados (0,73) y de brotes
(4,13). El uso de cortos periodos de tiempo y baja frecuencia de
inmersión en los RITA®, mejoraron el crecimiento de los brotes, siendo
el tiempo de inmersión el factor determinante para aumentar el número
de éstos. Asimismo, un inóculo de 10 brotes favoreció tanto el
crecimiento como el número de brotes obtenidos (8,92). Por otra parte,
se demostró que los cambios morfológicos inducidos por el ANC, en los
brotes de zábila en la fase de multiplicación eran transitorios,
retomando su crecimiento habitual durante la fase de enraizamiento. The products extracted from Aloe barbadensis Mill. (aloe) are
highly demanded by pharmaceutical, cosmetic and food industries. In
Venezuela, aloe propagation is carried out by offshoots; a single plant
produces three to four offshoots every year, which is not sufficient to
establish commercial plantations. Although in vitro propagation can be
an interesting alternative, its commercial use is limited due to
production costs. The use of recipient for automated temporary
immersion (RITA®) with growth retardants (GR) in culture media has
been considered an interesting option to increase the efficiency of
micropropagation. With the purpose to obtain an optimized protocol for
in vitro multiplication of aloe, the main technical and biological
parameters in RITA® using GR were evaluated. Thus, several
experiments were designed to evaluate the effect of GR, the immersion
time and frequency, the amount of inoculated shoot by recipient, and
finally the residual effect of GR in the rooting phase. The ancymidol
(ANC) and paclobutrazol (PBZ) induced shoot cluster formation and
reduced longitudinal growth; although ANC was selected because
showed higher number of both, clusters (0.73) and number of shoot
(4.13). The use of short periods of time and low immersion frequency in
RITA® improved the growth of shoot, being the immersion time the
critical factor to increase shoot number. In addition, an inoculum of 10
shoots promoted not only the growth but also the shoot number (8.92).
On the other hand, it was demonstrated that the morphological changes
induced by ANC in aloe shoots during the multiplication phase were
temporary, habitual growth was recovered during the rooting phase.
The genetic stability of vitroplant obtained by the micropropagation
process was estimated using RAPD (Random Amplified Polymorphic
DNA) and ISSR (Inter Simple Sequence Repeat). These molecular
analyses showed that 29 % of vitroplants were identical to progenitor...