Búsqueda de candidatos proteicos para el desarrollo de vacunas frente a las infecciones por streptococcus suis en cerdos

Abstract

Streptococcus suis es microorganismo de enorme repercusión económica para la industria porcina y una marcada importancia sanitaria, al ser considerado un agente zoonósico emergente. En base al polisacárido capsular, se reconoce la existencia de 35 serotipos, siendo los serotipos del 1 al 10, 14, 15, 16, 1/2 y 1/14 los que se asocian a la mayoría de los brotes clínicos en el cerdo y el hombre. El descubrimiento de una vacuna eficaz, elaborada con antígenos comunes y conservados entre serotipos se ha convertido en un objetivo prioritario mundial. Actualmente, la atención se ha desplazado hacia las proteínas de superficie, especialmente aquellas ancladas a la pared celular, que pueden ser detectadas con técnicas proteómicas. Hemos analizado mediante proteómica una colección de 39 cepas pertenecientes a 19 serotipos, utilizando la técnica del shaving, basada en la digestión de células vivas con proteasas y el posterior análisis de los péptidos generados por LC/MS/MS. Esto nos ha permitido definir el pan-surfoma de este grupo de aislados, identificado un total de 113 proteínas (33 lipoproteínas; 17 proteínas de la pared celular; 9 proteínas secretadas, 28 proteínas de membrana con un dominio transmembrana y 26 proteínas multitransmembrana). De todas las proteínas identificadas, tres proteínas de pared celular cell envelope proteinase (SSU0757), 5'-nucleotidase (SSU0860) y surface-anchored DNA nuclease o SsnA (SSU1760), podrían ser buenos candidatos vacunales, al estar presentes en más del 70 por ciento de los serotipos y estar más expuestas en la superficie. Seleccionamos la proteína “Surface-anchored DNA nuclease” (SsnA) para valorar su potencial como candidato vacunal, mediante ensayos de protección in vivo de la proteína recombinante rSsnA. Realizamos un estudio preliminar para seleccionar un adyuvante eficaz para su uso en formulaciones vacunales frente a las infecciones por S. suis en el modelo murino, utilizando un protocolo basado en...

Streptococcus suis is a microorganism of enormous economic impact to the swine industry with a public health concern, considered an emerging zoonotic agent. Based on the capsular polysaccharide, the existence of 35 serotypes are recognized, serotypes 1 through 10, 14, 15, 16, 1/2 and 1/14 are associated with the majority of clinical outbreaks in pigs and human. The discovery of an effective vaccine, made with common and conserved antigens between serotypes has become a global priority. Currently, attention has shifted to the surface proteins, especially those anchored to the cell wall, which can be detected with proteomic techniques. We analyzed using proteomic techniques a collection of 39 strains belonging to 19 serotypes, using the technique of shaving, based on digestion of live cells with protease and subsequent analysis of the generated peptides by LC/MS/MS. We define the pan-surfoma this group of isolates, and identify a total of 113 proteins (33 lipoproteins, 17 cell wall proteins, 9 secreted proteins, membrane proteins, 28 with a transmembrane domain and 26 multitransmembrane proteins). Of all the identified proteins, three proteins of cell wall cell envelope proteinase (SSU0757), 5'-nucleotidase (SSU0860) and surface-anchored DNA nuclease or SsnA (SSU1760) could be good vaccine candidates, because they are present in more than 70 percent of the serotypes and more exposed on the surface. We select the protein Surface-anchored DNA nuclease (SsnA) to evaluate their potential as a vaccine candidate using in vivo protection assays with the recombinant protein rSsnA. We conducted a preliminary study to select an effective adjuvant for use in vaccine formulations against infections by S. suis in the mouse model,...