Nonenzymatic release of N7-methylguanine channels repair of abasic sites into an AP endonuclease-independent pathway in Arabidopsis

Abstract

Los sitios abásicos (apurínicos/apirimidínicos, AP) en el ADN surgen debido a la pérdida espontánea de bases o por eliminación enzimática durante la reparación por escisión de bases. Es ampliamente aceptado que ambas clases de sitios AP tienen propiedades bioquímicas análogas y son sustratos equivalentes para AP endonucleasas y AP liasas, aunque los roles relativos de estos dos tipos de enzimas no se comprenden bien. En este trabajo proporcionamos evidencias genéticas y bioquímicas de que, en Arabidopsis, los sitios AP generados por la pérdida espontánea de N7-metilguanina (N7-meG) se reparan exclusivamente a través de una vía independiente de la AP endonucleasa iniciada por FPG, una ADN glicosilasa bifuncional con actividad de AP liasa. La incisión del sitio abásico catalizada por FPG genera un hueco de un solo nucleótido con un término de 3'-fosfato que es procesado por la 3'-fosfatasa de ADN ZDP para que así se pueda completar la reparación. Además, mostramos que la principal AP endonucleasa en Arabidopsis (ARP) rompe los sitios AP generados por la eliminación enzimática de N7-meG, pero inesperadamente no en aquellos resultantes de la pérdida espontánea de N7-meG.