Análisis citogenético y celular de la maduración ovocitaria, la capacitación espermática y el desarrollo embrionario temprano en el proceso de la fecundación in vitro de Bos taurus

Abstract

La utilización de la fertilización in vitro (FIV) en el ganado bovino ha experimentado en los últimos años un gran avance en su implementación a nivel industrial, principalmente en el continente americano. En la actualidad, la FIV se expande a pasos agigantados utilizándose cada día en más animales pertenecientes a distintas razas y distintos países. Si bien es cierto que la eficiencia de la FIV en el bovino está dentro las más altas en los animales de producción, ésta ha sufrido un estancamiento, manteniéndose en los niveles alcanzados desde hace ya varios años. En los últimos tiempos se ha realizado un gran esfuerzo intentando optimizar los protocolos de laboratorio teniendo en cuenta una gran cantidad de factores que, como se ha demostrado, condicionan los resultados obtenidos. Un factor a considerar es sin dudas la raza del animal. En este sentido se han observado diferentes respuestas en las distintas razas bovinas estudiadas. También ha sido detectada una mayor tasa de anomalías cromosómicas en los embriones producidos por FIV, lo cual conspira sin lugar a dudas contra la eficiencia que presenta esta técnica. Es por ello que durante el desarrollo de la presente tesis hemos investigado estos dos efectos descritos mediante una serie de experimentos divididos en tres capítulos. En el primer capítulo, centrado en la raza bovina de Lidia, hemos demostrado que sus ovocitos se adaptan correctamente a dos protocolos de maduración y fertilización in vitro utilizados de manera rutinaria en otras razas. También se ha observado que la cantidad de ovocitos recuperados de cada ovario Lidia es menor que la observada en otras razas estudiadas previamente...

The use of in vitro fertilization (IVF) in cattle has experienced in recent years a breakthrough in its commercial implementation, mainly in the Americas, rapidly expanding to animals of different breeds in different countries. The efficiency of IVF in cattle is within the highest in animal production. However, its rates has been maintained at the same point reached some years ago. In recent years, several researchers have been trying to optimize laboratory protocols considering a large number of factors which have been demonstrated conditioning results. One important factor to consider is the breed of the animal used, mostly because there were observed different behaviors in different cattle breeds studied previously. Another cause that has also been detected contributing the lack of efficiency is a higher rate of chromosomal abnormalities in IVF embryos. Due that we focused this thesis to investigate these two effects described through an experimental design dived into three chapters. In the first one, which focuses on Lidia bovine breed, we have shown that their oocytes can be matured and fertilized using standard laboratory protocols previously used in other breeds. We have also observed that the number of oocytes retrieved from each Lidia breed ovary is lower than that observed previously in other breeds. In the second chapter we analyzed cryopreserved semen samples from the four most important endangered Andalusian cattle breeds (Berrendo en Negro, Berrendo en Colorado, Cárdena Andaluza and Pajuna). We found that these doses are suited perfectly into standard in vitro capacitation protocols, which is a prerequisite for its use in IVF programs. This analysis also allowed us to verify that the sperm of the...