Obtención y caracterización de híbridos interespecíficos en Pisum y Lathyrus

Abstract

Con el objetivo de obtener líneas de introgresión de Lathyrus cicera en L. sativus y de Pisum fulvum, P. abyssinicum y tres subespecies de de P. sativum en P. sativum subsp. sativum, se ha analizado la composición genómica de una muestra de plantas de las generaciones F4 y F5 originadas del cruzamiento L. cicera x L. sativus, así como de las generaciones F1 y F2 originadas del cruzamiento de P. sativum subsp. sativum con cuatro guisantes silvestres y con las especies P. abyssinicum y P. fulvum. Además se ha analizado la posibilidad de utilizar la citometría de flujo para separa plantas con la sustitución monosómica del cromosoma 5 de L. cicera de las plantas hermanas euploide. Los análisis genómicos se realizaron mediante la hibridación in situ con los marcadores citológicos pTa71 y S5 (FISH), Así como con ADN genómico total de las dos líneas parentales (GISH). El análisis genómico de las plantas de la generación F4 provenientes del cruzamiento de L. cicera x L. sativus, mostró que todas ellas tienen 14 cromosomas y que el genoma predominante es el de L. sativus. Se han generado líneas de introgresión de L. cicera en L. sativus, que incluyen tanto sustituciones cromosómicas como cromosomas recombinantes. El análisis de la composición genómica de las líneas de introgresión ha permitido modificar el orden de los cromosomas en el cariotipo de L. cicera, estableciéndose una nueva relación de homología entre L. cicera y L. sativus. La diferencia observada en el índice de fluorescencia relativa de las plantas portadoras de la sustitución monosómica y las plantas euploides hermanas, ha permitido identificar las plantas con mayor probabilidad de portar el genotipo deseado reduciéndose el número de plantas a analizar por FISH. El análisis FISH de las plantas de P. fulvum ha permitido establecer la localización física de la subunidad 5S de rADN. El análisis GISH de las plantas de las generaciones F4 y F5 procedentes del cruzamiento L. cicera x L. sativus, permitió distinguir la cromatina de las líneas parentales presente en estas plantas. Sin embargo, el análisis GISH de las plantas de la generación F2 provenientes del cruzamiento P. sativum subsp. sativum x P. fulvum, no permitió identificar la cromatina proveniente de las líneas parentales. Este resultado ha obstaculizado la identificación de líneas de introgresión en el género Pisum...