Propagación in vitro de Zabila (Aloe Barbadensis Mill.) utilizando retardantes de crecimiento en sistemas de inmersión temporal

Abstract

Los productos extraídos de Aloe barbadensis Mill. (zábila) son altamente demandados por las industrias farmacéutica, cosmética y alimentaria. En Venezuela, la propagación de zábila se realiza a través de hijuelos, una planta produce de tres a cuatro hijuelos por año, lo cual es insuficiente para desarrollar plantaciones comerciales. Aunque la propagación in vitro puede ser una alternativa interesante, su uso a nivel comercial está limitado por los costos de producción. El uso de Recipientes de Inmersión Temporal Automatizados (RITA®) con retardantes de crecimiento (RC) en el medio de cultivo, está siendo considerada una opción de interés para aumentar la eficiencia del proceso de micropropagación. Con el propósito de obtener un protocolo optimizado para la multiplicación in vitro de zábila, se evaluaron los principales parámetros técnicos y biológicos en RITA® utilizando RC. Así, se diseñaron una serie de experimentos para evaluar el efecto de los RC, el tiempo y la frecuencia de inmersión, cantidad de brotes inoculados por recipiente y finalmente, el efecto residual del RC en la fase de enraizamiento. El ancimidol (ANC) y paclobutrazol (PBZ) promovieron tanto la formación de conglomerados de brotes como la reducción del crecimiento longitudinal, aunque se seleccionó el ANC porque mostró el mayor número de conglomerados (0,73) y de brotes (4,13). El uso de cortos periodos de tiempo y baja frecuencia de inmersión en los RITA®, mejoraron el crecimiento de los brotes, siendo el tiempo de inmersión el factor determinante para aumentar el número de éstos. Asimismo, un inóculo de 10 brotes favoreció tanto el crecimiento como el número de brotes obtenidos (8,92). Por otra parte, se demostró que los cambios morfológicos inducidos por el ANC, en los brotes de zábila en la fase de multiplicación eran transitorios, retomando su crecimiento habitual durante la fase de enraizamiento.

The products extracted from Aloe barbadensis Mill. (aloe) are highly demanded by pharmaceutical, cosmetic and food industries. In Venezuela, aloe propagation is carried out by offshoots; a single plant produces three to four offshoots every year, which is not sufficient to establish commercial plantations. Although in vitro propagation can be an interesting alternative, its commercial use is limited due to production costs. The use of recipient for automated temporary immersion (RITA®) with growth retardants (GR) in culture media has been considered an interesting option to increase the efficiency of micropropagation. With the purpose to obtain an optimized protocol for in vitro multiplication of aloe, the main technical and biological parameters in RITA® using GR were evaluated. Thus, several experiments were designed to evaluate the effect of GR, the immersion time and frequency, the amount of inoculated shoot by recipient, and finally the residual effect of GR in the rooting phase. The ancymidol (ANC) and paclobutrazol (PBZ) induced shoot cluster formation and reduced longitudinal growth; although ANC was selected because showed higher number of both, clusters (0.73) and number of shoot (4.13). The use of short periods of time and low immersion frequency in RITA® improved the growth of shoot, being the immersion time the critical factor to increase shoot number. In addition, an inoculum of 10 shoots promoted not only the growth but also the shoot number (8.92). On the other hand, it was demonstrated that the morphological changes induced by ANC in aloe shoots during the multiplication phase were temporary, habitual growth was recovered during the rooting phase. The genetic stability of vitroplant obtained by the micropropagation process was estimated using RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) and ISSR (Inter Simple Sequence Repeat). These molecular analyses showed that 29 % of vitroplants were identical to progenitor...