Embriogénesis somática en Guayabo (Psidium Guajava L.)

Abstract

El guayabo (Psidium guajava L.) constituye la especie más valiosa del género Psidium y tiene un importante valor frutícola para Venezuela, Latinoamérica y Europa. La introducción de nuevos cultivares de guayabo en Venezuela, plantea la necesidad de su propagación acelerada y la embriogénesis somática puede ser una alternativa de interés; por ello, en este trabajo se planteó establecer un protocolo de multiplicación para esta especie mediante esta vía. En la fase de inducción y utilizando como explanto embriones cigóticos inmaduros, se estudió el efecto de la formulación mineral, auxina, y sacarosa, lográndose porcentajes de formación de callo, callo embriogénico y masas pro-embriogénicas de 100%, 59,6% y 36,3%, respectivamente, en medio MS suplementado con 1 m.L-1 2,4-D, 400 mg.L-1 L-glutamina, 100 mg.L-1 ácido ascórbico, 60 g.L-1 sacarosa y 2,4 g.L-1 Phytagel, como agente gelificante. La proliferación de callo embriogénico tuvo lugar en el mismo medio de inducción. Asimismo, se estudió el efecto de los medios de cultivo MS y WPM, y la densidad de inóculo (2,5%, 5% y 10% de volumen de células sedimentadas, VCS) en el establecimiento y proliferación de suspensiones celulares embriogénicas. En medio MS se observó mayor VCS y menor consumo de sacarosa. Por otra parte, con la densidad 2,5% VCS se logró la mayor acumulación de biomasa, duplicándose a los 21 días de cultivo; la fase estacionaria ocurrió después de 42 días. Los estudios llevados a cabo en la fase de maduración mostraron un efecto negativo del ABA en el proceso. En relación con el porcentaje de germinación, se obtuvo un 64,16% en medio semisólido con la formulación MS al 50% de sus macroelementos y 55% en presencia de 50 g.L-1 de sacarosa. Por otra parte, la germinación en RITA® fue superior a la obtenida en medio semisólido, pero en RITA® se observó un mayor número de embriones con germinación incompleta. La...

Guava (Psidium guajava L.) is the most valuable specie that belongs to Psidium genus, which is a very important fruit crop in Venezuela, Latin America and Europe. The introduction of new guava cultivars into Venezuela creates a need for a fast propagation technique and the somatic embryogenesis represents an interesting alternative, therefore, this study was aimed to establish a guava multiplication protocol through embryogenesis. In the induction stage, mineral, auxin and sucrose effects were determined using immature zygotic embryos as explants. The percentages of callus, embryogenic callus and pro-embryogenic mass were 100%, 59.6% and 36.3%, respectively, on MS medium supplemented with 1 m.L-1 2,4-D, 400 mg.L-1 L-glutamine, 100 mg.L-1 ascorbic acid, 60 g.L-1 sucrose and 2,4 g.L-1 Phytagel as a gelling agent. Embryogenic callus proliferation took place on induction medium. Likewise, MS and WPM salts and inoculum density (2.5%, 5% and 10% settled cell volume, SCV) effects on establishment and proliferation of embryogenic cell suspension cultures were studied. Higher SCV and less sucrose consumption were observed on MS medium. On the other hand, 2.5% SCV gave rise to higher biomass accumulation, which was doubled at 21 days after culture, the stationary phase occurred after 42 days. The studies during the maturation stage showed a negative effect of ABA. Regarding the germination percentage, it was obtained 64.16% on semi-solid medium with 50% macronutrients of MS medium and 55% on 50 g.L-1 sucrose. On the other hand, the germination was higher in RITA® compared to the one obtained on semi-solid medium, nonetheless a larger number of embryos with uncompleted germination was observed in RITA®. The optimum frequency and immersion time to reach higher number of embryos with normal germination were 12 h and 1-2 min, respectively. The use of vessels...