Estudio del efecto de la congelación-descongelación sobre los parámetros morfométricos del espermatozoide del macho cabrío

Abstract

El objetivo del presente trabajo ha sido estudiar el efecto de la congelación-descongelación sobre los parámetros morfométricos de la cabeza del espermatozoide de macho cabrío, seleccionando para ello el método de análisis idóneo en esta especie, además de valorar la influencia de la estación y factores climáticos sobre los parámetros morfométricos. Para ello, empleando el Sperm Class Analyzer (SCA®), sobre un total de 16 eyaculados repartidos equitativamente entre 4 machos, se valoró la influencia de las tinciones Diff-Quik (DQ), Hemacolor (HC) y Hematoxilina de Harris (HH) en la eficacia del análisis de imagen y valores medios de los parámetros morfométricos de tamaño (longitud, anchura, área y perímetro) y forma de la cabeza (Elipticidad), estableciendo el número de necesario de células a analizar por preparación. Sobre 76 eyaculados de 2 machos, se valoró el efecto de la congelación-descongelación sobre los parámetros morfométricos empleando dos diluyentes (Tris y Lácteo) y estudiando, antes de congelar, la influencia de la estación y factores climáticos sobre los parámetros morfométricos. De forma complementaria al análisis morfométrico, en todas las muestras de esperma utilizadas se valoraron los parámetros seminales volumen, concentración, movimiento total y rápido progresivo, morfología y acrosoma. Para valorar la respuesta a la congelación-descongelación de los parámetros morfométricos en función de la congelabilidad de los eyaculados, se fijaron dos criterios de selección, uno a la precongelación de acuerdo a los parámetros evaluados, y otro a la descongelación en base a la respuesta de las dosis al test de la longevidad del movimiento progresivo. El análisis de un mínimo de 100 espermatozoides por preparación empleando la tinción DQ, resultó ser el método más eficaz para valorar con el SCA los parámetros morfométricos del espermatozoide. La estación del año influyó significativamente sobre los parámetros morfométricos, aumentado el tamaño de la cabeza y disminuyendo su elipticidad durante el otoño, lo que coincidió con los mayores porcentajes de movimiento rápido progresivo y formas normales. La temperatura ambiental provocó una reducción del tamaño de la cabeza y aumento de su elipticidad durante los periodos más calurosos. Aunque la influencia de esta sobre el movimiento, formas normales e integridad del acrosoma no fue significativa, observamos un descenso de sus valores cuando las temperaturas fueron más elevadas. La congelación-descongelación afectó a todos los parámetros morfométricos evaluados, con una reducción en el tamaño de la cabeza y un aumento de su elipticidad, acompañado de un descenso en los valores de movimiento e integridad del acrosoma a la descongelación. Se observaron diferencias significativas entre diluyentes, con una mayor reducción del tamaño de la cabeza tras la congelación-descongelación en el caso del Tris. El número de parámetros morfométricos de la cabeza del espermatozoide afectados por el proceso de congelación-descongelación, fue menor en aquellos eyaculados que cumplieron los requisitos exigidos a la precongelación cuando se empleó el diluyente Lácteo. El número de parámetros morfométricos de la cabeza del espermatozoide afectados por el proceso de congelación-descongelación, fue menor en las dosis que cumplieron el test de longevidad del movimiento