El papel de las células mioepiteliales en el carcinoma de mama canino
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Author
Sánchez Céspedes, Raquel
Director/es
Martín de las Mulas González-Albo, JuanaMillán Ruiz, Yolanda
Publisher
Universidad de Córdoba, Servicio de PublicacionesDate
2013Subject
Carcinoma de mama caninoCélulas mioepiteliales (ME)
Marcadores tumorales
Técnicas inmunihistoquímicas
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Los tumores de mama son las neoplasias más frecuentes en las hembras de la
especie canina y la participación de las células mioepiteliales (ME) en su
constitución es muy alta. Algunas de las investigaciones realizadas en el carcinoma
de mama humano mediante métodos inmunohistoquímicos y cultivos de células
ME purificadas indican que estas células podrían tener funciones supresoras de
tumor. En este trabajo hemos analizado el papel de las células ME en la invasión
estromal del carcinoma de mama y hemos estandarizado los métodos de
aislamiento, purificación y cultivo de células ME caninas. La integridad de la capa
de células ME alrededor de grupos de células epiteliales atípicas se valoró en
cortes de tejido de tumores benignos y malignos y se correlacionó con el grado de
malignidad y el índice de proliferación de las lesiones, observándose que el nivel
de expresión de calponina, el marcador utilizado para identificar dicha capa, era
similar en los tumores benignos y los malignos de grados histológicos 1 y 2. Estos
hallazgos indican que las células ME no son buenos marcadores de invasión para
el diagnóstico del carcinoma in situ de la mama canina, pero sí sugieren la
existencia de un efecto protector sobre la progresión de la enfermedad. El
aislamiento y purificación de las células ME requiere el uso de marcadores de
superficie específicos de las células ME de la mama canina no identificados
previamente. La expresión de CD10 y del antígeno de timocitos Thy1,
identificados recientemente como marcadores sensibles y específicos de la
membrana de las células ME en la mama humana, se analizó mediante técnicas
inmunohistoquímicas en células de inmunofenotipo ME y epitelial de la glándula
mamaria normal y neoplásica canina. El CD10, al igual que la mayoría de los
marcadores conocidos de las células ME de la mama canina, demostró ser sensible
pero no específico, mientras que el Thy1 marcó células ME exclusivamente.
Finalmente, se aislaron y purificaron las células ME de mamas normales y
neoplásicas caninas utilizando un método inmunomagnético (MACS) y el marcador
Thy1. Los resultados de este estudio demostraron la posibilidad de aislamiento y
cultivo de células ME caninas por primera vez en la literatura para así poder
estudiar in vitro su papel en el desarrollo de los tumores de la mama canina Mammary tumours are the most common neoplasms in female dogs and the
participation of the myoepithelial (ME) cells in its constitution is very high. Some
immunohistochemical and in vitro studies of human breast cancer suggest that
these cells have tumour suppressor functions. In these studies, the role of ME
cells in the stromal invasion of canine mammary carcinoma and the isolation,
purification and culture methods of canine ME cells have been analyzed and
standardized, respectively. The integrity of the ME cell layer around groups of
atypical epithelial cells was evaluated in tissue samples of benign and malignant
tumours and its correlation with the histological grade of malignancy and
proliferation index of the lesions were analyzed. Results showed that the level of
expression of calponin, the marker used to identify this layer, was similar in
benign and malignant tumours of histological grades 1 and 2. These findings
indicated that ME cells were not good marker of invasion to diagnose in situ
carcinoma of the canine mammary gland. On the contrary, they suggest a
potential protective on the progression of the disease. Isolation and purification of
ME cells requires the use of non-available specific surface markers of ME cells of
the canine mammary gland. The expression of CD10 antigen and Thy1 (thymocyte
differentiation antigen), both considered to be sensitive and specific surface
markers of human breast ME cells, were analyzed by immunohistochemistry in ME
cell and epithelial cell immunophenotypes of the normal and neoplastic canine
mammary gland. CD10, as the majority of canine ME cell marker, proved to be
sensitive but not specific, whereas Thy1 marked ME cells exclusively. Finally, ME
cells from normal and neoplastic canine mammary gland were isolated and
purified using an immunomagnetic method (MACS) and Thy1 marker. The results
of this study showed the possibility of isolation and culture of canine ME cells for
first time in literature opening this way the possibility of studying in vitro their role
in the development of canine mammary tumours with novel and powerful
techniques.